نوی کوروناویرس (SARS-Cov-2) د نیوکلیک اسید کشف کټ
New Coronavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit
(Fluایسکscent RT-PCR Probe Method) Product Manual
【Product name 】نوی کوروناویرس (SARS-Cov-2) د نیوکلیک اسید کشف کټ (د فلوروسینټ RT-PCR تفتیش میتود)
【Packaging specifications 】25 ټیسټ / کټ
【Intended usعمر】
دا کټ د نوي کورونویرس څخه د نیوکلیک اسید د کیفیت کشف لپاره په ناسوفرینجیل سویبونو ، اوروفرینجیل (سترګو) سویبونو ، د مخ د پوزې سویبونو ، د مینځني توربینیټ سویبونو ، د پوزې مینځلو او د هغه خلکو څخه چې د COVID19 لخوا د دوی د روغتیا پاملرنې شکمن وي د ناک اسپیریټ کشف لپاره کارول کیږي. د نوي کورونویرس د ORF1ab او N جینونو کشف د نوي کورونویرس انفیکشن د معاون تشخیص او ایپیډیمولوژیکي څارنې لپاره کارول کیدی شي.
【Principles of the procedure 】
دا کټ د ځانګړي TaqMan تحقیقاتو او ځانګړي پریمرونو لپاره ډیزاین شوی چې د ناول کورونویرس (SARS-Cov-2) ORF1ab او N جین ترتیبونو لپاره ډیزاین شوی. د PCR عکس العمل محلول د ځانګړو هدفونو کشف کولو لپاره د ځانګړي پریمرونو او فلوروسینټ پروبونو 3 سیټونه لري ، او د ځانګړي پریمرونو او فلوروسینټ پروبونو اضافي سیټ د داخلي کور ساتنې جینونو کشف کولو لپاره د کټ داخلي معیاري کنټرول په توګه کارول کیږي.
د ازموینې اصول دا دي چې ځانګړي فلوروسینټ پروب د PCR عکس العمل کې د Taq انزایم د exonuclease فعالیت لخوا هضم او تخریب کیږي ، نو د راپور ورکوونکي فلوروسینټ ګروپ او quenched فلوروسینټ ګروپ جلا کیږي ، ترڅو د فلوروسینټ نظارت سیسټم وکولی شي فلوروسینټ ترلاسه کړي. سیګنال، او بیا د PCR امپلیفیکیشن د غني کولو اغیزې له لارې، د تحقیقاتو فلوروسینس سیګنال د ټاکل شوي حد ارزښت - Ct ارزښت (د سایکل حد) ته رسیږي. د نه هدف امپلیکون په حالت کې، د تحقیقاتو راپور ورکوونکی ډله د شنډولو ګروپ ته نږدې ده. پدې وخت کې ، د فلوروسینټ ریزونانس انرژي لیږد پیښیږي ، او د راپور ورکونکي ګروپ فلوروسینس د قوی کولو ګروپ لخوا قند کیږي ، نو د فلوروسینټ سیګنال د فلوروسینټ PCR وسیلې لخوا کشف نشي.
د ازموینې په جریان کې د ریجنټونو کارولو نظارت کولو لپاره ، کټ د مثبت او منفي کنټرولونو سره مجهز دی: مثبت کنټرول د هدف سایټ recombinant پلاسمید لري ، او منفي کنټرول ډیسټل اوبه دي ، کوم چې د چاپیریال ککړتیا څارلو لپاره کارول کیږي. دا سپارښتنه کیږي چې د ازموینې پرمهال په ورته وخت کې مثبت کنټرول او منفي کنټرول تنظیم کړئ.
【Main components 】
| Cat. No. | BST-SARS-25 | BST-SARS-DR-25 | کمپونents | |
| نومe | سپیکification | کوانتity | کوانتity | |
| مثبت کنټرول | 180 μL/شیش | 1 | 1 | په مصنوعي ډول جوړ شوي پلاسمیدونه، د څښاک اوبه |
| منفي کنټرول | 180 μL/شیش | 1 | 1 | منحل اوبه |
| SARS-Cov-2 مخلوط | 358.5 μL/ویال | 1 | / | ځانګړي پریمر جوړه، ځانګړي کشف فلوروسینټ پروبونه، dNTPs، MgCl2، KCl، Tris-Hcl، ډیسټل اوبه، او نور |
| د انزایم مخلوط | 16.5 μL/ویال | 1 | / | Taq انزايمونه، ریورس ټرانسکريپټس، UNG انزايمونه، او نور. |
| SARS-Cov-2 مخلوط (Lyophilised) | 25 ټیسټونه / شیشې | / | 1 | ځانګړي پریمر جوړه، ځانګړي کشف فلوروسینټ تحقیقات، dNTPs، Taq انزایمونه، ریورس ټرانسکریپټیس، ډیسټل اوبه، او نور. |
| 2x بفر | 375 μL/شیش | / | 1 | MgCl2، KCl، Tris-Hcl، منحل شوي اوبه، او نور. |
نوټ:(1) په مختلف بیچ کټونو کې اجزا نشي مخلوط یا تبادله کیدی شي.
(2) خپل ریاجنټ چمتو کړئ: د نیوکلیک اسید استخراج کټ.
【Storage conditions او expiration date 】
For BST-SARS-25:ترانسپورت او ذخیره کول -20 ± 5 ℃ د اوږدې مودې لپاره.
For BST-SARS-DR-25:د خونې د حرارت درجه ترانسپورت. د اوږدې مودې لپاره په -20 ± 5 ℃ کې ذخیره کړئ.
د بار بار یخ وهلو دورې څخه مخنیوی وکړئ. د اعتبار موده په لنډمهاله توګه د 12 میاشتو لپاره ټاکل شوې ده.
د تولید او کارولو نیټې لپاره لیبل وګورئ.
د لومړي پرانستلو وروسته، ریجنټ په -20 ± 5 ° C کې د 1 میاشتې څخه ډیر یا د ریجنټ دورې پای ته رسیدو پورې زیرمه کیدی شي، هر هغه نیټه چې لومړی راشي، د تکرار فریز-تو دورې څخه مخنیوی وشي، او د ریجنټ منجمد شمیر څخه مخنیوی وشي. - د پړسوب دوره باید له 6 ځله څخه زیاته نه وي.
【Applicable instrument】ABI 7500, SLAN-96P, Roche-LightCycler-480.
【Sample requirements 】
1.Applicable نمونې ډول: استخراج nucleic اسید محلول.
2. د نمونې ذخیره کول او ټرانسپورټ: د 6 میاشتو لپاره په 20±5℃ کې ذخیره کړئ. نمونې له 6 ځله څخه زیات نه کنګل او یخ کړئ.
【Testing metهوډ】
1.Nucleic acid extraction
د ویروس نیوکلیک اسید استخراج لپاره مناسب نیوکلیک اسید استخراج کټ غوره کړئ، او د اړونده کټ لارښوونې تعقیب کړئ. سپارښتنه کیږي چې د نیوکلیک اسید استخراج او پاکولو کټ وکاروئ چې د Yixin Bio-Tech (Guangzhou) Co., Ltd. یا مساوي نیوکلیک اسید پاکولو کټ لخوا تولید شوي.
2. Reaction reagent preparation
2.1 For BST-SARS-25:
(1) د SARS-Cov-2 مکس او انزایم مکس لرې کړئ، په بشپړه توګه د خونې د حرارت درجه کې د Vortex آلې په واسطه په بشپړه توګه وخورئ او بیا په لنډه توګه سینټرفیوج کړئ.
(2) 16.5uL انزایم مکس په 358.5uL SARS-Cov-2 مکس کې اضافه شوی او په ښه توګه مخلوط شوی ترڅو د مخلوط عکس العمل حل ترلاسه کړي.
(3) یو پاک 0.2 ملی لیتر PCR اوکټل ټیوب چمتو کړئ او په هر څاه کې د پورته مخلوط عکس العمل 15uL سره په نښه کړئ.
(4) 15 μL پاک شوي نیوکلیک اسید محلول ، مثبت کنټرول او منفي کنټرول اضافه کړئ ، او په احتیاط سره د اوکټل ټیوب کیپ پوښ کړئ.
(5) د پورته ښکته کولو په واسطه ښه مخلوط کړئ، او ژر تر ژره سینټرفیوج کړئ ترڅو د تیوب په ښکته برخه کې مایع متمرکز کړي.
1
2.2 For BST-SARS-DR-25:
(1) 375ul 2x Buffer د SARS-Cov-2 Mix((Lyophilised) سره د عکس العمل مخلوط چمتو کولو لپاره اضافه کړئ. د پایپټینګ په واسطه ښه مخلوط کړئ او بیا په لنډ ډول سینټریفیوج کړئ. د اوږدې مودې ذخیره کول.)
(2) یو پاک 0.2 ملی لیتر PCR اوکټل ټیوب چمتو کړئ او په هر څاه کې د 15μL عکس العمل مخلوط سره نښه کړئ.
(3) 15μL پاک شوي نیوکلیک اسید محلول ، مثبت کنټرول او منفي کنټرول اضافه کړئ ، او په احتیاط سره د اوکټل ټیوب کیپ پوښ کړئ.
(4) د پورته ښکته کولو په واسطه ښه مخلوط کړئ، او ژر تر ژره سینټرفیوج کړئ ترڅو د تیوب په ښکته برخه کې مایع متمرکز کړي.
3. PCR amplification (مهرباني وکړئ د عملیاتو تنظیماتو لپاره د وسیلې لارښود ته مراجعه وکړئ.)
3. 1 PCR 8-ټیوب د فلوروسینټ PCR وسیلې نمونې خونې کې ځای په ځای کړئ او نمونه یې د ازموینې لپاره ترتیب کړئ ، مثبت کنټرول او منفي کنټرول د بارولو ترتیب سره سم.
3.2 د فلوروسینس کشف چینل:
(1) ORF1ab جین د FAM د کشف چینل غوره کوي (رپورټر: FAM، Quencher: هیڅ نه).
(2) N جین د VIC کشف چینل غوره کوي (رپورټر: VIC، Quencher: هیڅ نه).
(3) داخلي معیاري جین د CY5 د کشف چینل ټاکي (رپورټر: CY5، Quencher: هیڅ نه).
(4) غیر فعال حواله ROX ته ټاکل شوې ده.
3.3 د PCR پروګرام پیرامیټر ترتیب:
| ګام | دحرارت درجه (℃) | وخت | د سایکلونو شمیر | |
| 1 | د نقل نقل عکس العمل | 50 | 15 دقیقې | 1 |
| 2 | د تاک انزایم فعالول | 95 | 2.5 دقیقې | 1 |
| 3 | د تاک انزایم فعالول | 93 | 10 s | 43 |
| د annealing توسیع او د فلوروسینس استملاک | 55 | 30 s | ||
د تنظیم کولو وروسته، فایل خوندي کړئ او د عکس العمل پروګرام چل کړئ.
4.Results analysis
د برنامه پای ته رسیدو وروسته ، پایلې په اوتومات ډول خوندي کیږي ، او د امپلیفیکیشن وکر تحلیل کیږي. د امپلیفیکیشن وکر د وسیلې ډیفالټ حد ته ټاکل شوی.
【Explanation of test results 】
1. د تجربې اعتبار معلوم کړئ: د مثبت کنټرول FAM، VIC چینل باید یو عادي امپلیفیکیشن وکر ولري، او د Ct ارزښت عموما د 34 څخه کم وي، مګر کیدای شي د مختلفو وسایلو د مختلفو حدونو ترتیباتو له امله بدلون ومومي. منفي کنټرول FAM، VIC چینل باید غیر پراخ شوی Ct وي. دا موافقه وشوه چې پورته اړتیاوې باید په ورته وخت کې پوره شي، که نه نو دا ازموینه باطله ده.
2. د پایلو قضاوت
| FAM/VIC چینل | د قضاوت پایله |
| سیټ ج 37 | د نمونې ازموینه مثبته ده |
| 37≤Ct 40 | د امپلیفیکیشن وکر د S شکل دی، او شکمن نمونې باید بیا معاینه شي؛ که د بیا ازموینې پایلې ثابتې وي، دا د مثبت په توګه قضاوت کیږي، که نه دا منفي وي |
| Ct≥40 یا هیڅ پراخوالی | د نمونې ازموینه منفي ده (یا د کټ کشف ټیټ حد څخه ښکته) |
یادونه: (1) که چیرې د FAM چینل او VIC چینل دواړه په ورته وخت کې مثبت وي، د SARS-Cov-2 مثبت وي.
(2) که د FAM چینل یا VIC چینل مثبت وي او بل چینل منفي وي، ازموینه باید تکرار شي. که دا په ورته وخت کې مثبت وي، نو دا به د SARS-Cov-2 مثبت په توګه قضاوت وشي، که نه نو دا به د SARS-Cov-2 منفي په توګه قضاوت وشي.
اړوند محصولات
-
COVID-19 IgM/IgG انټي باډي کشف کټ
د COVID-19 IgM/IgG انټي باډي معلومولو کټ （د کولایډل د سرو زرو د امونوکروماتوګرافي میتود) د محصول لارښود 【د محصول نوم】COVID-19 IgM/IgG انټي باډي کشف کټ 【د کولایډل د سرو زرو د امونوکروماتوګرافي ټیکټ) 【 لنډیز】 ناول کورونویرس د β نسل پورې اړه لري. COVID-19 یوه حاد تنفسي ساري ناروغي ده. خلک عموما حساس دي. اوس مهال، د ناول کورونویرس لخوا اخته شوي ناروغان اصلي سرچینه ده ...
-
د نیوکلیک اسید استخراج یا پاکولو کټ
د نیوکلیک اسید استخراج یا د پاکولو کټ یا په -20℃ کې زیرمه شوی. نمونه باید د 0 ℃ curling په کارولو سره لیږدول شي. پیژندنه د نیوکلیک اسید استخراج یا پاکولو کټ (مقناطیسی موتی میتود) د اتوماتیک نیوکلیک اسید استخراج وسیلو په کارولو سره د بدن د مایعاتو (لکه سویبس ، پلازما ، سیرم) څخه د RNA او DNA اتومات پاکولو لپاره ډیزاین شوی. د مقناطیسي ذرې ټیکنالوژي د لوړ کیفیت DNA/RNA چمتو کوي چې د ...
-
SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit (Immunochromatogr...
د SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit （د امونوکروماتوګرافي میتود) د محصول لارښود 【د محصول نوم】SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit】د امونوکروماتوګرافي میتود) 【د بسته بندۍ مشخصات】 1 ازموینه/کیټ د کوروناویرس سره تړاو لري. COVID-19 یوه حاد تنفسي ساري ناروغي ده. خلک عموما حساس دي. اوس مهال، د ناول کورونویرس لخوا اخته شوي ناروغان اصلي دي ...
-
SARS-CoV-2 د انټيجن اسیس کټ
د SARS-CoV-2 انټيجن اسسي کټ （د امونوکروماتوګرافي میتود) د محصول لارښود 【د محصول نوم】SARS-CoV-2 انټيجن اسسي کټ (د امونوکروماتوګرافي میتود) 【د بسته بندۍ مشخصات】 1 ټیسټ/کیټ، ACTT51Kit/2STKit 】 د ناول کورونویرس د β جینس پورې اړه لري. COVID-19 یوه حاد تنفسي ساري ناروغي ده. خلک عموما حساس دي. اوس مهال، د ناول کورونویرس لخوا اخته شوي ناروغان د انفیکشن اصلي سرچینه ده؛ په ناروغۍ اخته کسان...