د نیوکلیک اسید استخراج یا پاکولو کټ
Nucleic Acid Extraction Or پاکول Kitیا په -20 ℃ کې زیرمه شوی. نمونه باید د 0 ℃ curling په کارولو سره لیږدول شي.
Introduction
د نیوکلیک اسید استخراج یا پاکولو کټ (مقناطیسی موتی میتود) د اتوماتیک نیوکلیک اسید استخراج وسیلو په کارولو سره د بدن د مایعاتو (لکه سویبس ، پلازما ، سیرم) څخه د RNA او DNA اتومات پاکولو لپاره ډیزاین شوی. د مقناطیسي ذرې ټیکنالوژي د لوړ کیفیت DNA/RNA چمتو کوي کوم چې د لاندې جریان غوښتنلیکونو کې د مستقیم کارونې لپاره مناسب دی لکه امپلیفیکیشن یا نور انزیماتیک عکس العمل.
Application Range
ټوله وینه، پلازما، سیرم او نور نسجونه په مستقیم ډول لیز شوي او هضم شوي. خوشې شوي نیوکلیک اسید په انتخابي ډول د سپر پارا مقناطیسي نانومیټر مقناطیسي موتی لخوا جذب شوي. بیا پروټین، غیرعضوي مالګه ایونونه او عضوي ناپاکۍ د مینځلو محلول له مینځه وړل شوي. په پای کې، نیوکلیک اسید د خالص نیوکلیک اسید محلول ترلاسه کولو لپاره ایلوینټ سره جلا شوی.
Kit Contents
بلی. نه. | YXN-VIRAL01-32A-BR | اجزا | ||
-50A | - 100A | |||
اندازه | 32 ټیس | 50 ټیسټ | 100 ټیسټ | |
لیسیس بفر | 96 ښه پری پیک ed پلیټونه 2 ټوټې | 25ml | 50ml | Surfactant او Tris |
د مینځلو بفر I | ★15ml | ★30ml | د لوړ مالګې حل | |
د بفر Il مینځل | ★6ml*2 | ★12ml*2 | د کم مالګې حل | |
Elution بفر | 10ml | 20ml | د کم مالګې حل | |
میګابیو ریجنټ | 1.0ml | 2.0ml | مقناطیسي ذرات | |
لاسي کتاب(=YXN-VIRAL01-32A-BR) | 1 | 1 | 1 | |
Nاوټس:لپارهYXN-VIRAL01-32A-BR-50A,15mL مطلق ایتانول اضافه کړئ ★15mL د مینځلو بفر I د کارولو دمخه؛ 24mL مطلق ایتانول د استعمال څخه دمخه ★6mL د مینځلو بفر Il ته اضافه کړئ. | ||||
لپارهYXN-VIRAL01-32A-BR-100A30mL مطلق ایتانول ★30mL واش بفر I ته د کارولو دمخه اضافه کړئ؛ 48mL مطلق ایتانول اضافه کړئ ★12mL د مینځلو بفر Il د کارولو دمخه. 【ریجنټونه چې د کارونکي لخوا چمتو کیږي】مهرباني وکړئ مطلق ایتانول (تحلیقي درجه) پخپله چمتو کړئ. |
Stنارنج Conditions
د کټ په رارسیدو سره، د کټ اجزا د خونې په حرارت (15 - 25 ° C) کې زیرمه کیدی شي. ریجنټونه د تولید نیټې څخه تر یو کال پورې مستحکم دي.
Sample Requirements
1. د تطبیق وړ نمونه: سویب، پلازما، سیرم او ټوله وینه.
2. نمونه ذخیره او ترانسپورت: نمونه باید سمدستي ازموینه شي
Materials او Devices Required but Not Provided
1. د ضایع کیدو وړ پوډر پرته دستکشې
2. بایوهزارډ کانتینر
3. پنسل یا فی
Procedure
لاندې د نمونې پټې استخراج سویب لوشن د مثال په توګه کاروي ترڅو په بیولوژیکي نیوکلیک اسید استخراج وسیلې کې د استخراج ریجنټ عملیاتي مرحلې په لنډ ډول تشریح کړي.Bioer NPA-32PیاSMART 32. د نورو نمونو ډولونو لپاره، مهرباني وکړئ د کارن لارښود ته مراجعه وکړئ. دا د پیرودونکو لخوا هم د تجربوي لاسته راوړنو سره سم پرمخ وړل کیدی شي:
1. Reagent تیاری
a. لپارهYXN-VB03-32A-50A او YXN-VB03-32A-100A
د 2.2mL 96 ژور څاه پلیټ کالم 1 او 7 کې 500uL لیسس بفر اضافه کړئ، 500uL واش بفر I په کالم 2 او 8 کې، 500uL واش بفر II کالم 3، 4 او 9,10 ته؛ کالم 5 او 11 ته 70uL Elution بفر، 180uL خالص اوبه او 20uL میګابیو ریجنټ کالم 6 او 12 ته (مقناطیسي موتی باید د کارولو دمخه په ښه توګه مخلوط شي)
ب. لپارهYXN-VB03-32A
د خونې په حرارت کې 96 ښه پری بسته شوي ریجنټ واچوئ. 96 - ښه پلیټ د درې ځله لپاره پورته کړئ، او پلاستيکي کڅوړه یې وباسئ. د څو ثانیو لپاره پری بسته شوي ریجنټ سینټرفیوژ کړئ (یا څو ځله د لاس په واسطه تیر کړئ) ترڅو د ټیوب دیوال ته د ریجنټ وتړل کیدو څخه مخنیوی وشي. د 96 څاه پلیټ د المونیم ورق فلم وتړئ او د پلیټ سمت وپیژنئ (مقناطیسی موتی په کالم # 6 او # 12 کې)
2.نمونه استخراج
1. 300uL نمونه د 96 څاه پلیټ کالمونو #1 او #7 ته اضافه کړئ، مهرباني وکړئ د کراس ککړتیا څخه مخنیوی وکړئ،
2. آله ته د 96 ژور څاه پلیټ ځای په ځای کړئ، په وسیله کې د 8 پټو لارښوونو نصب کړئ،
3. برنامه د لاندې پروسیجرونو سره سم پرمخ وړئ،
4. وروسته له دې چې د اتوماتیک پاکولو پای ته ورسیږي، د 5 او 11 کالمونو کې د elution Buffer یو پاک انټي نیوکلیر 0.5mL سنټرفیوج ټیوب ته انتقال کړئ؛ که سمدلاسه یې ونه کاروئ ، مهرباني وکړئ په -20 ° C کې ذخیره کړئ.
Performance Characteristics
1. استخراج شوی محصول د لوړ حساسیت HBV DNA کشف ریجنټ لخوا کشف شوی ترڅو د 10 IU/mL حساسیت ته ورسیږي. استخراج شوی محصول د لوړ حساسیت HCV RNA کشف ریجینټ لخوا کشف شوی ترڅو د 50 IU/mL حساسیت ته ورسیږي.
2. 4 نمونې وټاکئ (د سیرم/پلازما نمونه، د ناسوفرینجیل سویب نمونه، د رحم د خارج شوي حجرو نمونه)، هره نمونه 10 ځله د 3 درجې سره (د اصلي نمونې ټولټال 4 غلظت په ګډون)، د داخلي کشف کولو لپاره د وړ ریجنټونو او ازموینې اجنټانو په کارولو سره. د محصول د لارښوونو سره سم حواله جین، او د هرې بستې د Ct ارزښت له 1 څخه لږ توپیر لري.
Step | ښه ځای | Prاوګرام نوم | Waiting Time(min:SS) | Mixing Time(mپه:SS) | Magnet Time(min:SS) | Adsorption | Speed | Volume ټاټس (μL) | Tامپراتورۍ |
1 | 1 | Lyخور | ۰:۰0 | 2:۰۰ | ۰:۰0 | F | 700 | 80 | |
2 | 6 | Bایډز | ۰:۰0 | 0:15 | 0:15 | √ | F | 200 | |
3 | 1 | Bind | ۰:۰0 | ۳:۰0 | 0:45 | √ | F | 700 | |
4 | 2 | Wایش۱ | ۰:۰0 | 0:30 | 0:30 | √ | F | 500 | |
5 | 3 | Wash2 | ۰:۰0 | 0:30 | 0:30 | √ | F | 500 | |
6 | 4 | Wash3 | ۰:۰0 | 0:30 | 0:30 | √ | F | 500 | |
7 | 5 | Elution | 2:۰۰ | 2:30 | 0:30 | F | 70 | 80 | |
8 | 6 | رد کړئ | ۰:۰0 | 0:15 | ۰:۰0 | F | 200 |
Safety
1. جنرالAL خوندیتوب.
د دې محصول کارول په داسې طریقه کارول چې د کارونکي په اسنادو کې ندي مشخص شوي ممکن د شخصي ټپي کیدو یا وسیلې یا وسیلې ته زیان ورسوي. ډاډ ترلاسه کړئ چې هرڅوک چې دا محصول کاروي د لابراتوارونو لپاره د عمومي خوندیتوب تمریناتو او پدې سند کې چمتو شوي خوندیتوب معلوماتو کې لارښوونې ترلاسه کړي.
1.1 د وسیلې یا وسیلې کارولو دمخه ، د وسیلې یا وسیلې جوړونکي لخوا چمتو شوي د کارونکي اسنادو کې چمتو شوي خوندیتوب معلومات ولولئ او پوه شئ.
1.2 د کیمیاوي موادو له مینځلو دمخه، ټول د تطبیق وړ خوندیتوب ډیټا شیټونه (SDSs) ولولئ او پوه شئ او مناسب شخصي محافظتي تجهیزات وکاروئ (دستانې، جامې، د سترګو محافظت، او نور). د SDSs ترلاسه کولو لپاره، په دې سند کې د "اسنادو او ملاتړ" برخه وګورئ.
2. کیمیاوي خوندیتوب
عمومي کیمیاوي اداره کول. د خطرونو کمولو لپاره، ډاډ ترلاسه کړئ چې د لابراتوار پرسونل لاندې د کیمیاوي کارونې، ذخیره کولو، او کثافاتو لپاره عمومي خوندیتوب لارښوونې ولولئ او تمرین کړئ، او د ځانګړو احتیاطاتو او لارښوونو لپاره د اړونده SDS سره مشوره وکړئ: د کیمیاوي موادو لخوا چمتو شوي د خوندیتوب ډیټا شیټ (SDSs) ولولئ او پوه شئ. تولید کونکی مخکې له دې چې تاسو له کوم کیمیاوي یا خطرناکو موادو سره ذخیره کړئ، سمبال کړئ یا کار وکړئ.
2.1 د کیمیاوي موادو سره تماس کم کړئ. مناسب شخصي محافظتي تجهیزات واغوندئ کله چې کیمیاوي توکي سمبال کړئ (د بیلګې په توګه، د خوندیتوب شیشې، دستکشې، یا محافظتي جامې).
2.2 د کیمیاوي موادو تنفس کم کړئ. کیمیاوي کانتینرونه خلاص مه پریږدئ. یوازې د کافي هوا ورکولو سره وکاروئ (د مثال په توګه ، فوم هوډ).
2.3 په منظمه توګه د کیمیاوي لیک یا توزیع لپاره وګورئ. که لیک یا تویدنه واقع شي، د تولید کونکي پاکولو کړنالرې تعقیب کړئ لکه څنګه چې په SDS کې وړاندیز شوي.
2.4 د کیمیاوي کثافاتو اداره کول په فوم هوډ کې.
2.5 د لومړنیو او ثانوي کثافاتو کانټینرونو کارول ډاډمن کړئ. (لومړنۍ ضایع
کانټینر سمدستي کثافات ساتي. یو ثانوي کانټینر د لومړني کانټینر څخه توزیع یا لیکونه لري. دواړه کانتینرونه باید د فاضله موادو سره مطابقت ولري او د کانټینر ذخیره کولو لپاره فدرالي ، ایالتي او محلي اړتیاوې پوره کړي.)
2.6 وروسته له دې چې د کثافاتو کانټینر خالي کړئ، د چمتو شوي کیپ سره یې مهر کړئ.
2.7 ستاسو په لابراتوار کې کارول شوي ځانګړي غوښتنلیکونو ، ریجنټونو او فرعي سټیټونو لخوا رامینځته شوي کثافات مشخص کړئ (که اړتیا وي د تحلیل په واسطه).
2.8 ډاډ ترلاسه کړئ چې کثافات د ټولو محلي، دولتي/ولایتي، او/یا ملي مقرراتو سره سم زیرمه شوي، لیږدول کیږي، لیږدول کیږي او تصفیه کیږي.
2.9 راډیو اکټیو یا بایو خطرناک مواد ممکن ځانګړي اداره کولو ته اړتیا ولري، او د ضایع کولو محدودیتونه ممکن پلي شي.
3.بیولوژیکي خطر خوندیتوب
احتمالي بایو خطر. په دې وسیله کارول شوي نمونو پورې اړه لري، سطح ممکن د بایو خطر په توګه وګڼل شي. کله چې د بایو خطرونو سره کار کوئ د پاکولو مناسب میتودونه وکاروئ.
بایوهزارد. بیولوژیکي نمونې لکه نسجونه، د بدن مایعات، انتاني اجنټان، او د انسانانو او نورو حیواناتو وینه د ساري ناروغیو د لیږد وړتیا لري. ټول د تطبیق وړ محلي، دولتي/ولایتي، او/یا ملي مقررات تعقیب کړئ. مناسب محافظتي تجهیزات واغوندئ، کوم چې پکې شامل دي مګر محدود ندي: محافظتي سترګې، د مخ پوښ، جامې / لابراتوار کوټ، او دستکشې. ټول کارونه باید د مناسبو خوندیتوب تجهیزاتو په کارولو سره په سم سمبال تاسیساتو کې ترسره شي (د بیلګې په توګه، د فزیکي کنټرول وسایل). افراد باید د احتمالي انتاني موادو سره کار کولو دمخه د پلي کیدو وړ مقرراتو او شرکت / ادارې اړتیاو سره سم وروزل شي.
په لاندې ډول د تطبیق وړ لارښوونې او/یا تنظیمي اړتیاوې ولولئ او تعقیب کړئ:
په متحده ایالاتو کې: د متحده ایالاتو د روغتیا او بشري خدماتو ریاست لارښودونه په مایکروبیولوژیکي او بایو میډیکل لابراتوارونو کې د بایو سیفټي په برخه کې خپاره شوي: www.cdc.gov/biosafety.
د حرفوي خوندیتوب او روغتیا معیارونه، د وینې زیږون ناروغۍ (29 CFR§1910.1030)، موندل شوي:
www.access.gpo.gov/nara/cfr/waisidx_01/29cfr1910a_01.html
ستاسو د شرکت/ادارې د بایوسفټي پروګرام پروتوکولونه د احتمالي ساري ناروغیو موادو سره کار کولو / اداره کولو لپاره. د بایوهزارډ لارښوونو په اړه نور معلومات په www.cdc.gov کې شتون لري.
په اروپايي اتحادیه کې: د بیو خطر او بیولوژیکي احتیاط په اړه محلي لارښوونې او قانون وګورئ او د نړیوال روغتیا سازمان (WHO) لابراتوار بایو خوندیتوب لارښود کې خپاره شوي غوره عملونو ته مراجعه وکړئ، دریمه نسخه، دلته موندل شوي: www.who.int/csr/resources/publications /ژوندي خوندیتوب/WHO_CDS_CSR_LYO_200 4_11/en/.